Методы Выделения Чистой Культуры Микробиология

Для выращивания аэробов необходимы питательные среды, создание оптимальных температурных условий и наличие кислорода. Обычно рост бактерий в виде помутнения жидких питательных сред или образования колоний на плотных средах наблюдается через 18—24 ч культивирования в термостате. Для того чтобы изучить морфологические, культуральные, ферментативные (биохимические) и другие свойства микробов определенного вида, необходимо получить его чистую культуру. Чистая культура — микроорганизмы одного вида, полученные из одной или нескольких клеток в результате размножения на искусственной питательной среде. Существуют различные методы получения чистой культуры из микробных ассоциаций.

Для выделения изолированных колоний, из которых выращивают чистую культуру, небольшое количество исследуемого материала вносят петлей в расплавленный и остуженный до 43°С агар в пробирке, тщательно перемешивают и смесь выливают в чашку Петри. Микробы в форме изолированных колоний растут как по поверхности агара (аэробы), так и внутри него (анаэробы). Этот метод, предложенный Кохом, применяется в настоящее время для определения общего количества бактерий, находящихся в воде и пищевых продуктах.

Чистую культуру аэробов получают обычно, засевая каплю исследуемого материала на поверхность застывшего агара в чашке Петри. Каплю распределяют по всей чашке с помощью специального шпателя Дригальского или бактериологической петли. Из отдельных микробных клеток через 16—20 ч культивирования в термостате образуются изолированные колонии. Каждая колония — популяция микроорганизмов, развившаяся из одной бактериальной клетки определенного вида бактерий. Колонии бактерий имеют различные размеры (от 2 до 4 мм), округлую правильную или неправильную форму, гладкую или шероховатую поверхность, ровные или фестончатые края и различную консистенцию. Колонии бактерий могут быть бесцветными или имеют белый, золотистый, красный, лимонно-желтый цвет за счет образования пигмента. Метод, предложенный Дригальским для выделения чистых культур аэробов, наиболее часто применяется и в настоящее время. Биологический метод получения чистых культур основан на заражении чувствительных экспериментальных животных исследуемым материалом, содержащим микробные...